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    武漢病毒所證實:金銀花可抑制新冠病毒復制

    2020-08-11 來源:https://www.nature.com/articles/s41421-020-00197-3 點擊數:2045

     

    此前,已有研究表明,雙黃連口服液、金銀花、綠茶能夠防控新型冠狀病毒感染,但有不少人稱,這些研究僅屬于初步研究,對于普通民眾防疫來說沒有太多參考價值。

    近日,一項研究切實表明金銀花湯中的植物MIR2911能夠抑制SARS-CoV-2的復制,并且加速了新冠感染患者的痊愈。該研究成果發表在《自然》子刊《細胞發現》(Cell Discovery)上。

    作者包括南京大學張辰宇教授團隊、武漢病毒所張磊砢,及南京市第二醫院易永祥等。

    此前的研究表明,在金銀花湯劑(HD)中富集的植物microRNA MIR2911,可以通過與甲型流感病毒(IAV)mRNA結合并阻斷蛋白翻譯,直接靶向甲型流感病毒(IAV),包括H1N1、H5N1H7N9亞型。

    口服HD可預防IAV感染,減少H5N1誘導的小鼠死亡。

    后續研究表明,除了IAVs,MIR2911還可以直接抑制多種病毒的復制。

    在經過膳食攝取后,這些microRNAs會自我組裝成外泌體,然后分泌到循環中,并運送到靶組織或特定細胞,包括肝、肺、脾、胰腺和T細胞。

    鑒于MIR2911獨特的富含GC的核苷酸組成,研究人員分析了SARS-CoV-2的基因組序列后,發現病毒基因組很可能含有MIR2911結合位點,MIR2911可以直接抑制SARS-CoV-2的復制。

    在本研究中,他們評估了HD中吸收的MIR2911SARS-CoV-2復制的抑制作用,并對HDCOVID-19患者中的療效進行了臨床研究。

    通過生物信息學分析,他們預測在SARS-CoV-2基因組中有179個推定的mir2911結合位點。

    經典熒光素酶實驗確認了28個結合位點,它們廣泛分布在病毒基因組中(Fig. 1a),表明MIR2911可能能夠抑制幾乎所有SARS-CoV-2蛋白的翻譯。

    Fig.1)

    為了評估吸收的MIR2911SARS-CoV-2復制的直接影響,從轉染合成MIR2911或對照非編碼RNA (ncRNA)HEK293T細胞培養基中收集細胞外泌體,方法與之前的報道相似(Fig.1b)。

    將分離的含或不含MIR2911的細胞外泌體與Vero E6細胞(ATCC-1586)分別在0.25 ml細胞培養基中孵育8小時。

    改變培養基后,細胞感染SARS-CoV-2,病毒感染復數(MOI)0.01。

    在感染后24小時(p.i),通過實時定量RT-PCR (qRT-PCR)對細胞培養液中的病毒拷貝數進行定量評估(Fig.1b)。

    如圖1c所示,細胞外泌體-MIR291113.2 pM的濃度下抑制了93%的病毒復制,表明吸收的MIR2911直接并充分抑制了SARS-CoV-2的復制(Fig.1c)。

    接下來,他們評估了在HD中吸收的MIR2911SARS-CoV-2復制的抑制作用。

    由于在HD中吸收的MIR2911通過循環由外泌體進入肺,分別從飲200 ml HD (30 g干金銀花)前后的供者血清62.5 mol / l中分離的外泌體分別與Vero E6細胞孵育,與細胞外泌體- MIR2911的情況相似(Fig.1b)。

    200 ml HDMIR2911的濃度為52.5 pM (10.5 pmol/200 ml/30 g金銀花干)。

    三個健康接受者在飲用2小時后的血清MIR2911水平為0.42,0.451.13 pM(Fig.1d),在飲前無法檢測到。

    如圖1e所示,含有MIR2911的外泌體顯著抑制了病毒復制(Fig.1e)。

    從同一供體收集的MIR2911在飲用HD前后的外泌體細胞存活率沒有差異。

    這些結果強烈表明,飲用HD的人可以充分吸收MIR2911,并且吸收的MIR2911可以顯著阻止SARS-CoV-2的復制。

    為了評估HDMIR2911COVID-19患者的抗病毒作用,他們進行了一項臨床研究。

    本研究納入20201月至20203月在南京第二醫院接受常規抗病毒治療的75例中重度COVID-19患者。

    將患者在RT基礎上加用MIR2911治療(MIR2911+)或中藥合劑(MIR2911 -)分為兩組,以次治療后第7天的轉化率為主要終點。

    MIR2911+組和MIR2911 -組分別為6例和69例。

    MIR2911+組第7天的陰轉化率為83.3%,較MIR2911 - TCM組有明顯改善(26.1%,P = 0.004)( Fig. 1g, f)。

    接受HD-MIR2911治療的患者,變得陰性(TTN)所需的時間也對他們有利。(平均4.0天和12.0天,HR 0.28, 95% CI 0.12-0.67, P = 0.005) ( Fig. 1g, f)

    男性患者MIR2911+(1)MIR2911 -(38)的中位TTN分別為5.0天和11.0(HR 0.003, 95% CI 0.000018-0.52, P = 0.027)。

    女性患者MIR2911+(5)MIR2911 -(31)的中位TTN分別為3.0天和12.0(HR 0.15, 95% CI 0.031-0.68, P = 0.014)。

    在中國,HD被用于治療病毒感染已有一千年的歷史。

    既往研究表明,1-3 ml HD中的MIR2911 (0.06-0.18 pmol/day)20 g小鼠中顯著抑制流感病毒復制。

    他們選擇30克金銀花干(MIR 2911水平:10.5 pmol)每天使用。

    結果表明,30克金銀花干使用是安全的,具有充分的抗病毒功能(Fig. 1d, e)。

    另一方面,數據顯示外泌體中的MIR2911顯著抑制病毒復制,不僅證實了MIR2911超強的抗病毒活性 (remdesivir: 3.7μM和氯喹:10μM) ,還提供了一個新策略,使用從健康供體收集的血清外泌體提供了最相似的體內條件來評估潛在藥物在體外的療效。

    綜上所述,結果表明,在HD中吸收的植物MIR2911抑制了SARS-CoV-2的復制,并加速了感染患者的負轉化。

    HD治療可能極大地幫助治愈感染患者,阻止COVID-19大流行。

    編譯/前瞻經濟學人APP資訊組


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